通化市熱啟動(dòng)Taq酶研發(fā)
發(fā)布時(shí)間:2025-06-06 00:55:26
通化市熱啟動(dòng)Taq酶研發(fā)
傳染病流行過(guò)程的三:個(gè)基本環(huán)節(jié):①傳染源。即傳染來(lái)源,就是被感染的動(dòng)物,包括傳染病病畜禽和帶菌(毒)動(dòng)物,如潛伏期帶菌(毒)、病愈后帶菌(毒)及健康動(dòng)物帶菌(毒)等。②傳播方式和途徑。有直接接觸傳播及間接接觸傳播。③易感動(dòng)物。就是對(duì)某種傳染病的病原體有易感性的動(dòng)物。

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選擇靈敏度高的熱啟動(dòng)Taq酶。一般說(shuō),Taq酶的擴(kuò)增效率高,靈敏度就高,但也有不一致的情況。如果要擴(kuò)增的樣本目標(biāo)基因豐度較低,建議對(duì)Taq酶的擴(kuò)增靈敏度進(jìn)行檢測(cè)。常見(jiàn)的檢測(cè)方法是將目標(biāo)基因質(zhì)粒片段進(jìn)行10倍或5倍梯度稀釋,在較低的幾個(gè)稀釋度進(jìn)行PCR檢測(cè),選擇檢測(cè)靈敏度較高的熱啟動(dòng)Taq酶。目前國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上常用的ABI、Bioline、Biog的擴(kuò)增靈敏度都比較高,但知名品牌T的靈敏度略低,研究者可根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。

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動(dòng)物為什么要打預(yù)防針:主要是預(yù)防和控制傳染病的發(fā)生。傳染病的發(fā)生具備傳染源、傳染途徑和易感動(dòng)物三個(gè)環(huán)節(jié),缺一不可。在防疫中,切斷任何一個(gè)環(huán)節(jié),傳染即告終止。打預(yù)防針是將有效的生物制品(疫苗、菌苗、類毒素)作為抗源,引入動(dòng)物機(jī)體,或注入免疫血清,以激發(fā)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生特異性抵抗力,使易感動(dòng)物轉(zhuǎn)化為不易感動(dòng)物的一種手段,由于過(guò)去通常采用注射法,所以人們習(xí)慣上把免疫接種稱為打預(yù)防針。有組織、有計(jì)劃地進(jìn)行免疫接種,是預(yù)防和控制動(dòng)物傳染病發(fā)生流行的重要措施之一,在某些傳染病如禽流感、口蹄疫、豬瘟等病的防控措施中,免疫接種更具有關(guān)鍵性的作用。所以,打預(yù)防針是為養(yǎng)殖業(yè)保駕護(hù)航,可以避免疫病發(fā)生,減少死亡損失,使養(yǎng)殖業(yè)增收。

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常規(guī)普通PCR常見(jiàn)問(wèn)題:1. 優(yōu)化反應(yīng)條件,梯度摸索退火溫度,延長(zhǎng)退火延伸時(shí)間,增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)(30-45區(qū)間為宜)。2. 對(duì)核酸模板進(jìn)行純化,或使用商業(yè)化核酸提取試劑盒進(jìn)行提取,增加核酸模板的上樣量。3. 優(yōu)化反應(yīng)體系(預(yù)混體系除外),改變檢測(cè)體系中的Mg2+濃度及dNTPs用量,更換體系中Buffer。4. 重新設(shè)計(jì)引物,避免引物二聚體和鏈內(nèi)二級(jí)結(jié)構(gòu),在一次稀釋引物后可分裝成多支小管,減少反復(fù)凍融次數(shù)。

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做好免疫記錄。養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)要詳細(xì)記錄畜禽存欄、出欄、免疫等情況,特別是疫苗種類、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號(hào)等信息。鄉(xiāng)鎮(zhèn)動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)、村級(jí)防疫員要做好免疫記錄、按時(shí)報(bào)告,確保免疫記錄與畜禽標(biāo)識(shí)相符。落實(shí)報(bào)告制度。各省份按月報(bào)告疫苗采購(gòu)及免疫情況。在每年3—5月、9—11月春秋兩季集中免疫期間,對(duì)免疫進(jìn)展實(shí)行周報(bào)告制度。各省份要明確專人負(fù)責(zé)匯總、統(tǒng)計(jì)免疫信息,按時(shí)報(bào)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中 心。